ABSTRACT
A necessidade de implantação de uma nova conduta sorodiagnóstica para Paracoccidiomicose (PCM), na região Norte do Paraná, surgiu pela falta de correlação entre as condições clínicas dos pacientes com exame ou anatomopatológico positivo para P. brasiliensis, com os resultados de reação de fixação de complemento utilizando antígeno polissacarídico comercial Pimenta Abreu (AgPA). A reavaliação foi realizada utilizando-se 43 soros com requisição de sorologia para PCM, negativos por fixação de complemento com AgPA. Os testes utilizados foram imunodifusão radial, Fixação de Complemento, Elisa e Western Blotting, utilizando exoantígeno de 7 dias (Ag7d de P. brasiliensis e glicoproteína de 43KDa de P. Brasiliensis. Não foi observada nenhuma reação positiva com AgPA mesmo em pacientes diagnosticados por exames anatomopatológicos e ou micológicos AgPA, enquanto que a positividade pós-reação de fixação de complemento utilizando Ag7d foi de 37,2% e por imunodifusão radial dupla de 25,5%. Foi realizada também análise desses soros pelo ensaio: ELISA clássico com o Ag7D, ELISA captura com a glicoproteína de 43KDa (Gp43) de P. brasiliensis e Western blotting com Ag7d, obtendo-se 81,4%. Os resultados aqui obtidos mostram claramente a necessidade de controle de qualidade na produção e padronização de antígeno como reagente para imunodiagnóstico.
Subject(s)
Humans , Paracoccidioidomycosis , Serologic TestsABSTRACT
Os receptores solúveis para eritrócitos de carneiro (E) podem ser encontrados sob forma solúvel em soros humanos, e em níveis elevados em patologias associadas com a imunossupressäo. No presente trabalho, concordando com os dados da literatura observamos nível de receptores solúveis para E (Rs) em níveis elevados em soros de pacientes com hanseníase. A partir desses soros, isolamos Rs de peso moleculares distintos, Rs1 (= 58 KDa) e Rs2 (acima de 150 KDa), por cromatografia por gel filtraçäo (Sephadex G-200) e por troca iônica (DEAE celulose), concordando com os resultados obtidos anteriormente com soros de pacientes urêmicos ou neoplásicos. As fraçöes positivas detectadas, por ensaio imunoenzimático, quando analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida e por "western blotting" utilizando soro anti-Rs, demonstraram apenas uma banda de Rs1 e uma ou duas bandas para Rs2. Para verificar se os mesmos apresentavam alguma relaçäo com CD2, molécula de superfície de linfócito T que interage com E, e com CD58, ligante natural de CD2, foi realizado ensaio imunoenzimático utilizando anticorpos monoclonais respectivos. Os resultados obtidos sugerem a inexistência de relaçäo de Rs1 e Rs2 com a molécula CD2 ou CD58